蛋白质定性分析服务
a.蛋白质全谱分析
蛋白质全谱分析也可称为质谱shotgun分析，指的是组分分析，研究对象是完整的组织、体液或其提取物，其目的在于鉴定出尽可能多的肽和蛋白质分子。蛋白质质谱鉴定的基本原理是用蛋白酶将蛋白质消化成肽段混合物，用电子轰击或者其他方式使其离子化，形成不同质荷比的带电离子，然后顺利获得质量分析器将具有特定质荷比的肽段离子分离开来。顺利获得实际谱图和理论上蛋白质经过蛋白酶消化后产生的一级质谱峰图和二级质谱峰图进行的比对，从而进行蛋白鉴定。
蛋白质全谱分析示意图
使用仪器：THERMO: Orbitrap Eclipse、Orbitrap Exploris 480、Q Exactive plus; AB SCIEX: TripleTOF 5600 plus。
技术优势：可全面鉴定整个细胞、组织或复杂混合样品中的大量蛋白质，可鉴定200-5000个蛋白。
应用领域：某一生理状态下组织、细胞或者细胞器中所有表达蛋白质的鉴定。
样品要求：
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样品 |
样品要求 |
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蛋白质溶液 |
蛋白质总量>500μg，浓度>0.1μg/μl； |
项目周期:
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进展 |
时间周期 |
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收样/质控 |
2-3个工作日 |
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样品处理 |
4-5个工作日 |
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质谱上机 |
2-3个工作日 |
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数据分析 |
2-3个工作日 |
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总计 |
不超过15个工作日 |
备注：超过5个样本每增加1个增加3个工作日，如需加急请联系我方协商处理。
b.蛋白质胶条/混合液鉴定
利用LC-MS/MS技术对单一胶条(即SDS-PAGE样本)、IP、Co-IP、Pull-down纯化溶液等中等复杂样本进行蛋白鉴定。
凝胶电泳条带鉴定路线图
pull-down实验路线图
使用仪器：THERMO ：Orbitrap Eclipse 、Orbitrap Exploris 480、QE plus 高分辨质谱。
技术优势：高灵敏度，高准确性。适合中度复杂的蛋白质样品，如相互作用的蛋白质条带。
应用领域：疾病标志物研究，作用机制研究，植物抗逆研究，药物作用靶点研究，特殊功能蛋白质鉴定。
样品要求：
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样品 |
样品要求 |
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SDS-PAGE条带 |
考染、银染（质谱兼容）条带清晰可见 |
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蛋白质溶液 |
蛋白质总量>5μg，浓度>0.1μg/μl； |
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缓冲液不含去污剂NP40、Triton X-100等 |
项目周期：
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项目流程 |
服务周期 |
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收样/质控 |
1-2个工作日 |
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样品处理 |
2-3个工作日 |
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质谱上机 |
2-3个工作日 |
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数据分析 |
2-3个工作日 |
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报告编写 |
1-2个工作日 |
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总计 |
不超过10个工作日 |
备注：超过10个样本每增加1个增加1个工作日，如需加急请联系我方协商处理。
